為探究嗜酸乳桿菌對(duì)人體腸道細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用,將pH 5.5和pH 7.5條件下培養(yǎng)的具有不同黏附特性的嗜酸乳桿菌與人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29共同培養(yǎng),測(cè)定其免疫因子的變化。通過反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)了熱休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-8、IL-10、核因子κB(nuclear factor κB,NF-κB)、Toll樣受體4(Toll-like receptors 4,TLR-4)和腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因的相對(duì)表達(dá)量,采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定了免疫因子IL-8、IL-10和TNF-α蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果表明,HT-29細(xì)胞與兩種pH值條件下的嗜酸乳桿菌共同培養(yǎng)后,在轉(zhuǎn)錄水平上,較空白對(duì)照組均呈現(xiàn)出Hsp70和TNF-α基因表達(dá)的極顯著上調(diào),IL-8、NF-κB和TLR-4基因表達(dá)的極顯著下調(diào)(P<0.01)。pH 7.5組與pH 5.5組對(duì)比,Hsp70、IL-10和TNF-α的基因表達(dá)顯著上調(diào),NF-κB和TLR-4的基因表達(dá)顯著下調(diào)(P<0.05);在兩種pH值條件下,HT-29細(xì)胞的TNF-α質(zhì)量濃度極顯著高于空白對(duì)照組,而IL-8的質(zhì)量濃度極顯著降低,并且pH 7.5組的IL-10質(zhì)量濃度極顯著高于pH 5.5組(P<0.01)。綜上,弱酸、弱堿性腸道條件下的嗜酸乳桿菌能促進(jìn)腸道細(xì)胞免疫,且pH 7.5的弱堿性腸道環(huán)境與pH 5.5的弱酸性腸道環(huán)境相比,更能顯著增強(qiáng)嗜酸乳桿菌對(duì)腸道的免疫效應(yīng),維護(hù)腸道健康。
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