以酶解超聲提取法提取鐵皮石斛多糖,通過對料液比、超聲時間、復合酶質(zhì)量分數(shù)的單因素試驗和正交試驗,確定鐵皮石斛多糖的最佳提取條件;以高效液相色譜法對鐵皮石斛多糖進行組成成分分析;以香豆素-3-羧酸熒光法測定鐵皮石斛多糖的羥自由基清除能力;以噻唑藍實驗和細胞流式實驗研究鐵皮石斛多糖提取物對SH-SY5Y細胞的保護作用。結(jié)果表明,最優(yōu)鐵皮石斛多糖提取條件為料液比1∶100(g/mL)、超聲時間2 h、復合酶(纖維素酶和果膠酶1∶1等質(zhì)量混合)質(zhì)量分數(shù)50%,最優(yōu)提取條件下鐵皮石斛多糖得率為25.69%,其主要單糖組分為甘露糖和葡萄糖。在質(zhì)量濃度為20~80 μg/mL范圍內(nèi)鐵皮石斛多糖提取物能有效清除Cu2+催化H2O2產(chǎn)生的羥自由基并有效抑制SH-SY5Y細胞的凋亡(凋亡率從56.97%下降到17.97%),且其作用效果成質(zhì)量濃度依賴性。因此,鐵皮石斛多糖可通過清除羥自由基從而抑制Cu2+催化H2O2產(chǎn)生羥自由基誘導的SH-SY5Y細胞凋亡。
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