目的:探討煙酰胺核糖(nicotinamide riboside,NR)作為一種營養(yǎng)補(bǔ)充劑對酒精暴露小鼠抑郁樣行為及腸黏膜通透性的改善效果。方法:30 只雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為3 組(10 只/組),對照組和模型組每天給予0.2 mL生理鹽水灌胃,NR干預(yù)組(NR組)每天給予400 mg/kg mb NR灌胃。每周一至周四上午8時至下午16時給予模型組和NR組小鼠新鮮配制的體積分?jǐn)?shù)15%乙醇水溶液自由飲用,下午16時至次日上午8時給予其自來水自由飲用;對照組小鼠全天給予自來水自由飲用,周五、六切斷3 組小鼠一切水源,周日給予3 組小鼠自來水自由飲用。干預(yù)期間3 組小鼠自由進(jìn)食,實(shí)驗(yàn)持續(xù)10 周。采用曠場實(shí)驗(yàn)、糖水偏好實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)評價小鼠抑郁樣行為;蘇木精-伊紅染色觀察小鼠海馬組織CA1區(qū)病理學(xué)改變;酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)檢測各組小鼠血清中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)質(zhì)量濃度;采用透射電子顯微鏡對小鼠空腸和結(jié)腸組織細(xì)胞連接裝置超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察;采用示蹤實(shí)驗(yàn)觀察小鼠空腸和結(jié)腸組織滲透性;免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測小鼠空腸和結(jié)腸組織中緊密連接蛋白o(hù)ccludin及ZO-1表達(dá)水平。結(jié)果:與對照組和NR組相比,模型組小鼠在曠場實(shí)驗(yàn)的總運(yùn)動距離和中央?yún)^(qū)域停留時間縮短,糖水偏愛度明顯下降,同時,強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中模型組不動時間達(dá)到(168.6±34.4)s,較對照組((107.9±47.4)s)顯著延長(P<0.05);NR干預(yù)后,其抑郁樣行為較模型組明顯改善。模型組小鼠海馬CA1區(qū)出現(xiàn)部分神經(jīng)細(xì)胞損傷,血清BDNF水平達(dá)到(438.9±46.7)pg/mL,較對照組((638.1±77.3)pg/mL)顯著降低(P<0.05);NR干預(yù)后,神經(jīng)細(xì)胞損傷得到一定程度修復(fù),血清BDNF水平達(dá)到(735.7±55.7)pg/mL,較模型組顯著升高(P<0.05)。模型組小鼠血清LPS水平達(dá)到(22.5±1.8)ng/mL,與對照組((13.2±3.0)ng/mL)相比顯著升高(P<0.05);其空腸和結(jié)腸黏膜上皮緊密連接和中間連接等細(xì)胞連接裝置發(fā)生形態(tài)學(xué)異常改變;示蹤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對照組比較,模型組小鼠空腸和結(jié)腸組織滲透性增加;Western blot結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組比較,模型組小鼠空腸及結(jié)腸occludin、ZO-l蛋白表達(dá)水平均顯著降低(P<0.05)。NR干預(yù)后,小鼠血清LPS水平降低,達(dá)到(17.5±0.3)ng/mL,空腸及結(jié)腸組織滲透性及細(xì)胞連接裝置得到明顯改善和修復(fù),occludin和ZO-l蛋白表達(dá)水平亦發(fā)生不同程度上調(diào)。結(jié)論:NR可有效緩解酒精暴露小鼠抑郁樣行為,其作用機(jī)制可能與NR對酒精性抑郁小鼠腸黏膜通透性的修復(fù)作用有關(guān)。
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