以沙棘籽粕蛋白為原料,酶解制備具有抑制胰脂肪酶活性的多肽,通過超濾、大孔樹脂分離、超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜和分子對接對沙棘籽粕蛋白肽(seabuckthorn seed peptides from alcalase hydrolysates,SSPA)進行分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定和篩選。以豬胰脂肪酶(porcine pancreatic lipase,PPL)抑制率為指標,穩(wěn)定性分析表明,SSPA具有熱穩(wěn)定性和pH值穩(wěn)定性,適量Na+和Mg2+可顯著提高SSPA的PPL抑制活性,SSPA在短期貯藏過程中不會因暴露于空氣而影響PPL抑制活性。超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜鑒定得到31 種多肽,結(jié)合分子對接篩選得到6 個肽段,小于3 kDa組分中上述寡肽含量分別為VR(2.90%)、FR(7.40%)、RDR(1.10%)、APYR(1.50%)、NLLHR(1.40%)和EEAASLR(1.10%)。固相合成測定其IC50值分別為VR(371.07 μg/mL)、FR(243.07 μg/mL)、RDR(250.50 μg/mL)、APYR(350.41 μg/mL)、NLLHR(220.70 μg/mL)、EEAASLR(510.55 μg/mL)。分子對接表明以上多肽通過氫鍵、π-π堆積與PPL結(jié)合。Pearson相關性分析表明,分子對接結(jié)合能與SSPA的PPL抑制率之間存在顯著正相關(R2=0.865,P<0.05)。
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