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—— 中國食品雜志社
采用紫外分光光度法、瓊脂糖凝膠電泳法和實時熒光聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）等檢測DNA濃度、純度、完整性和反應靈敏度，綜合評價Nucleo試劑盒、Wizard試劑盒、Dneasy試劑盒、Ezup試劑盒、Dzup試劑盒和十二烷基硫酸鈉（sodium dodecyl sulfate，SDS）法對大豆蛋白及大豆籽粒中DNA的提取效果，旨在篩選出適用于大豆分離蛋白（soybean protein isolate，SPI）、大豆?jié)饪s蛋白（soybean protein concentrate，SPC）及大豆籽粒中DNA提取的最佳方法，提高轉基因大豆檢測的精確性和準確性。結果表明，Nucleo試劑盒和Dneasy試劑盒能夠得到純度高、完整性好的DNA，符合實時熒光PCR的檢測要求。Dneasy試劑盒提取的DNA純度更高，更有利于提高后續(xù)PCR的重復性、穩(wěn)定性和精確性，普遍適用于SPI、SPC以及大豆籽粒中DNA的提取。Wizard試劑盒、Ezup試劑盒和SDS法提取效果適中，SDS法成本最低，但耗時最長。Dzup試劑盒得到的DNA雖然濃度高，但含雜質較多，對實時熒光PCR具有抑制作用，且無法保持完整的基因組DNA，不適用于大豆轉基因檢測中的DNA提取。采用Dneasy試劑盒提取得到的SPI和SPC樣品DNA，對不同長度lectin基因擴增結果不同，表明在蛋白制備過程中l(wèi)ectin基因可能存在降解。
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