本研究以大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞(IEC-6)為對(duì)象,通過體外實(shí)驗(yàn),采用3 種不同的巴氏殺菌方式(63 ℃、30 min,72 ℃、15 s和85 ℃、15 s)處理牛源乳鐵蛋白,模擬嬰兒胃腸道消化環(huán)境,利用所得的牛源乳鐵蛋白水解液刺激IEC-6細(xì)胞,研究乳鐵蛋白在巴氏殺菌后的免疫活性。結(jié)果表明:巴氏殺菌后的乳鐵蛋白水解物仍具有促進(jìn)腸細(xì)胞增殖的免疫學(xué)活性,且呈劑量依賴性。流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)巴氏殺菌后的牛源乳鐵蛋白水解液可提高IEC-6細(xì)胞在G2/M期和S期的比例,并降低細(xì)胞凋亡率。反轉(zhuǎn)錄實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)結(jié)果表明,牛源乳鐵蛋白水解液提高cyclin B1、CDK1和cyclin E1的表達(dá)水平,降低p21的表達(dá)水平。綜上可知,巴氏殺菌不能完全使乳鐵蛋白免疫基團(tuán)失活。兩種巴氏殺菌方法(72 ℃、15 s和85 ℃、15 s),尤其是85 ℃、15 s處理,在保證食品安全的同時(shí)可最大限度地保留乳鐵蛋白的免疫活性。3 種巴氏殺菌后的乳鐵蛋白水解液促進(jìn)腸道免疫的最佳質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL。
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