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以豬小腸黏膜提取物作為α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV的酶活力分析體系的建立
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 127 發(fā)表時(shí)間: 2019-12-30
作者: 甲承立,Naveed HUSSAIN,董潔,王芬,李函彤,張書文,蘆晶,逄曉陽,劉鷺,呂加平
關(guān)鍵詞: α-葡萄糖苷酶;二肽基肽酶IV(DPP-4);豬小腸;酶比活力
摘要:

α-葡萄糖苷酶和二肽基肽酶IV(dipeptidyl peptidase 4,DPP-4)是II型糖尿病治療中2 種重要的靶向酶。這兩種商品化酶價(jià)格昂貴且主要來源于微生物,難以有效用于兩種酶抑制劑的篩選,而這兩種酶均普遍存在哺乳動(dòng)物的小腸中。為了獲得經(jīng)濟(jì)有效、來源于哺乳動(dòng)物體內(nèi)的α-葡萄糖苷酶和DPP-4,本研究收集新鮮的豬小腸黏膜分泌物及上皮細(xì)胞,對(duì)比分析了豬小腸不同部位黏膜提取物的α-葡萄糖苷酶和DPP-4的活力。以豬小腸黏膜提取物作為α-葡萄糖苷酶和DPP-4的酶反應(yīng)體系,并且利用這兩種酶的陽性藥(阿卡波糖和抑二肽素A(diprotin A,IPI))分別進(jìn)行了抑制率驗(yàn)證和評(píng)價(jià)。阿卡波糖對(duì)商品和豬回腸源α-葡萄糖苷酶的半數(shù)有效抑制質(zhì)量濃度(median inhibition concentration,IC50)分別是1.102 4、0.244 7 mg/mL;IPI對(duì)商品和豬回腸源DPP-4的IC50分別為19.119 7、41.268 4 μg/mL。通過比較發(fā)現(xiàn),豬回腸黏膜提取物的α-葡萄糖苷酶和DPP-4比活力分別為0.084 1、0.053 4 U/mg,在3 種黏膜提取物中均為最高,因此選擇豬回腸黏膜提取物作為商品化α-葡萄糖苷酶和DPP-4的替代物進(jìn)行抑制劑的篩選。

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