為確定嗜熱酸性生淀粉α-淀粉酶Gt-amy中結(jié)構(gòu)域C對(duì)其催化性能的影響,本研究采用基于蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)的環(huán)化重排方法對(duì)Gt-amy的結(jié)構(gòu)域C進(jìn)行分子改造,獲得Gt-amy環(huán)化重排突變體,并比較了突變體的生淀粉吸附率、生淀粉降解率、酶比活力以及動(dòng)力學(xué)常數(shù)。與Gt-amy相比,生淀粉吸附能力提高的Gt-amy環(huán)化重排突變體,其生淀粉降解能力也得到提高;生淀粉吸附能力降低的Gt-amy環(huán)化重排突變體,其生淀粉降解能力也降低。即Gt-amy的生淀粉降解能力和生淀粉吸附能力之間存在正相關(guān)性。其中,環(huán)化重排突變體Gt-amy-S498的生淀粉吸附率由78.86%提高至93.14%,生淀粉降解率由65.80%提高至90.93%。本研究證實(shí)環(huán)化重排突變可以作為一種工程學(xué)手段改變蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能,為提高酶類蛋白質(zhì)的催化性能提供了思路。
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