以磁性Fe3O4-SiO2納米顆粒為載體,研究固定化條件對(duì)磷脂酶活力的影響,通過響應(yīng)面試驗(yàn)得到最優(yōu)固定化條件為:固定化pH 6.7、固定化溫度30 ℃、固定化時(shí)間7.9 h、戊二醛質(zhì)量分?jǐn)?shù)8.3%、加酶量8.2 mL/50 mg,在此條件下酶活力回收率能達(dá)到63.6%,蛋白固載率68%。并對(duì)制備的固定化磷脂酶的化學(xué)組分、形態(tài)結(jié)構(gòu)和粒徑進(jìn)行分析,結(jié)果表明磷脂酶固定化效果較好,粒徑均一,載體平均粒徑為200 nm左右。固定化酶熱穩(wěn)定性、pH值穩(wěn)定性和貯藏穩(wěn)定性增強(qiáng),最適反應(yīng)溫度為50 ℃,最適pH 6.0,重復(fù)操作10 次后保留60%以上的初始酶活力。
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