以姜科植物益智果實為原料,采用水蒸氣蒸餾法提取其精油,采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析益智精油的化學(xué)成分;通過濾紙片法和微量對倍稀釋法分別測定益智精油對單核細(xì)胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)的抑菌圈、最低抑菌質(zhì)量濃度(minimal inhibitory concentration,MIC)及最低殺菌質(zhì)量濃度(minimum bactericidal concentration,MBC),評價其抑菌活性,利用掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察益智精油對菌體微觀形態(tài)的影響,并通過測定菌體的生長曲線、電導(dǎo)率變化、大分子物質(zhì)泄漏、超氧化物歧化酶(super oxide dismutase,SOD)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量探究益智精油對單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的抑菌機理。結(jié)果表明:從益智精油中共鑒定出45 種化合物,以萜烯類、芳香烴及萜類含氧衍生物為主,其中巴倫西亞橘烯、圓柚酮、2,6,10,10-四甲基雙環(huán)[7.2.0]十一烷-1,6-辛二烯、(2S,4aR,8aR)-4a,8-二甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,2,3,4,4a,5,6,8a-八氫萘、(2R,8R,8aS)-8,8a-二甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,2,3,7,8,8a-六氫萘和對傘花烴為相對含量較高的化合物;此外,益智精油可顯著抑制單核細(xì)胞增生李斯特氏菌活性,其抑菌圈直徑為14.20 mm,MIC和MBC分別為0.195、0.781 mg/mL,生長曲線測定發(fā)現(xiàn),益智精油抑菌活性呈濃度依賴性;掃描電子顯微鏡和透射電子顯微鏡顯示益智精油可破壞單核細(xì)胞增生李斯特氏菌細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu),改變菌體細(xì)胞膜的通透性,造成細(xì)胞內(nèi)大量電解質(zhì)、大分子內(nèi)容物(核酸和蛋白質(zhì))泄漏,破壞菌體內(nèi)SOD系統(tǒng)原有的動態(tài)平衡狀態(tài),導(dǎo)致SOD活力變化,同時誘導(dǎo)大量自由基生成,導(dǎo)致菌體細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)氧化程度升高,使MDA含量增加。綜上,益智精油作用于單核細(xì)胞增生李斯特氏菌導(dǎo)致菌體細(xì)胞一系列變化,從而抑制菌體的生長并導(dǎo)致其凋亡,是益智精油中多種成分、多靶點協(xié)同作用的結(jié)果,初步分析萜烯類、芳香烴類和酮類物質(zhì)是其抑菌的主要有效成分,為益智作為食品行業(yè)天然抑菌劑的開發(fā)利用提供了科學(xué)理論依據(jù)。
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