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—— 中國(guó)食品雜志社
本研究探討了猬木霉M6-5揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)香梨采后黑斑病菌鏈格孢（Alternaria alternata）細(xì)胞膜和細(xì)胞壁的影響。首先將生長(zhǎng)5 d的猬木霉培養(yǎng)基與含鏈格孢菌餅培養(yǎng)基對(duì)扣，測(cè)定30 ℃培養(yǎng)3、5、7 d的抑菌效果；通過掃描電鏡和透射電鏡觀察處理組和對(duì)照組鏈格孢菌絲體；收集兩組鏈格孢菌絲體，采用碘化丙啶（propidiumiodide，PI）染色法觀察鏈格孢細(xì)胞膜完整性，測(cè)定電導(dǎo)率等細(xì)胞膜相關(guān)指標(biāo)；使用鈣熒光白（calcofluor white，CFW）染色法測(cè)定鏈格孢頂端生長(zhǎng)細(xì)胞的形態(tài)變化，并進(jìn)行堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，AKP）活力和N-乙酰葡糖胺質(zhì)量濃度分析。結(jié)果表明：在培養(yǎng)期間內(nèi)，猬木霉產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)鏈格孢均具有良好的抑菌效果，處理組鏈格孢菌絲出現(xiàn)皺縮、腫脹和部分?jǐn)嗔训默F(xiàn)象，細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)減少情況比對(duì)照組更嚴(yán)重，局部伴有質(zhì)壁分離現(xiàn)象；而對(duì)照組菌絲則生長(zhǎng)正常，孢子結(jié)構(gòu)完整，切面結(jié)構(gòu)清晰，胞質(zhì)均勻，細(xì)胞壁和細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)正常。經(jīng)猬木霉M6-5揮發(fā)性物質(zhì)處理后，處理組鏈格孢電導(dǎo)率、丙二醛水平、蛋白質(zhì)和核酸泄漏量均顯著高于對(duì)照組；PI染色觀察到處理組鏈格孢菌絲體發(fā)出紅色熒光，說明猬木霉揮發(fā)性物質(zhì)破壞了鏈格孢細(xì)胞膜的完整性，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物外泄，細(xì)胞膜的正常功能受到顯著破環(huán)。CFW染色觀察到兩組鏈格孢菌絲體熒光強(qiáng)度無明顯差異，處理組和對(duì)照組的AKP活力和N-乙酰葡糖胺質(zhì)量濃度也無顯著差異，說明猬木霉揮發(fā)性物質(zhì)對(duì)鏈格孢細(xì)胞壁未產(chǎn)生破壞作用，其主要作用靶位也并不是細(xì)胞壁。綜上，猬木霉M6-5揮發(fā)性物質(zhì)的抑菌靶點(diǎn)是鏈格孢的細(xì)胞膜。
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