本研究通過自由基法將蛋清蛋白(egg white protein,EWP)與迷迭香酸(rosmarinic acid,RA)共價偶聯(lián),通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和RA結(jié)合量分析驗證偶聯(lián)效果。利用多光譜技術(shù)(傅里葉變換紅外光譜、圓二色光譜、熒光及紫外吸收光譜)解析EWP-RA結(jié)構(gòu)變化;通過1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基和2,2’-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS)陽離子自由基清除實驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗及乳化性能測定,評估EWP-RA的抗氧化能力、抗原性及功能特性。結(jié)果表明,EWP-RA與EWP相比結(jié)構(gòu)顯著改變,從而使功能特性發(fā)生改變,包括抗氧化能力和乳化性能。EWP-RA 0.2(RA質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.2%)對DPPH自由基和ABTS陽離子自由基的清除率分別為58.59%和72.08%。EWP-RA對雞蛋過敏患者免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)G和IgE抗體的結(jié)合率明顯降低,表明其與抗原結(jié)合潛力降低。EWP-RA 0.02(RA質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.02%)的乳化活性指數(shù)和乳化穩(wěn)定性指數(shù)分別為1.21 m2/g和64.20 min,RA修飾有效增強了EWP的乳化性和穩(wěn)定性。本研究可為自由基法對EWP進(jìn)行多酚共價修飾提供理論基礎(chǔ)。
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