建立一種利用高效液相色譜法檢測肉制品中腺苷酸、肌苷酸、鳥苷酸、次黃嘌呤核苷、次黃嘌呤的方法,并對(duì)其進(jìn)行方法學(xué)考察。結(jié)果表明:優(yōu)化后的方法為樣品中加入體積分?jǐn)?shù)為5%的高氯酸溶液,常溫振蕩器振蕩30 min,離心,取上清液,在樣品中再加入體積分?jǐn)?shù)5%的高氯酸溶液重復(fù)提取1 次,合并2 次提取液,調(diào)節(jié)提取液pH值為6.5,用水轉(zhuǎn)移定容至50 mL。取少量提取液,加入正己烷液液萃取除雜,離心,取下層溶液。采用液相色譜儀進(jìn)行分析,使用C18柱,流動(dòng)相為0.01 mol/L磷酸二氫鉀-甲醇溶液(98∶2,V/V),流速1.0 mL/min,等度洗脫;檢測波長254 nm,進(jìn)樣量20 μL,外標(biāo)法定量。經(jīng)方法學(xué)考察,5 種核苷酸在0.5~80 μg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好,決定系數(shù)均大于0.999,檢出限為5.0 mg/kg,定量限為15.0 mg/kg,加標(biāo)回收率為80.1%~109.5%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差≤9.6%(n=3)。綜上所述該方法具有操作簡便、定量準(zhǔn)確、重復(fù)性好等特點(diǎn),利于廣泛推廣,可以應(yīng)用于復(fù)雜基質(zhì)的肉制品中5 種游離核苷酸的檢測。
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