領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
為實現(xiàn)酶法水解菊糖制備高果糖漿，從宛氏擬青霉（Paecilomyces variotii）XS27發(fā)酵液中分離純化菊粉酶，并對其酶學(xué)特性進(jìn)行研究。發(fā)酵液經(jīng)過硫酸銨鹽析、透析、DEAE-Sepharose Fast Flow層析、Sephacry S-100分子篩過濾層析，得到電泳純的菊粉酶，比活力327.4 U/mg，純化倍數(shù)37.85。十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰氨凝膠電泳測得菊粉酶為單一亞基的酶蛋白，分子質(zhì)量62.0 kDa。菊粉酶能在較寬的pH值范圍（3.5～6.5）內(nèi)保持高活性，最適作用pH 4.0。在溫度40～65 ℃之間，酶活力較高，最適作用溫度為60 ℃。薄層色譜分析顯示菊粉酶水解菊糖最終產(chǎn)物為果糖。以菊糖為底物，酶的Km和Vmax分別為5.93 μmol/L和75.18 μmol/（L·min）。Mg2＋、Mn2＋、Ca2＋對酶有顯著激活作用，Ba2＋、Ni2＋和Hg2＋對酶有一定抑制作用。β-巰基乙醇、二硫蘇糖醇和乙二胺四乙酸對酶有抑制作用，表面活性劑（十二烷基硫酸鈉、Tween 80和Trition X100）以及乙醇對酶活力沒有影響。從宛氏擬青霉XS27發(fā)酵液中分離純化的菊粉酶在強(qiáng)酸高熱的環(huán)境下具有強(qiáng)活性和穩(wěn)定性，對表面活性劑乙醇有高耐受性，適合于果葡糖漿的工業(yè)化生產(chǎn)。
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