領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
本研究旨在探討盧氏發(fā)光桿菌（Photobacterium rosenbergii）中κ-卡拉膠酶Cgk483的重組表達(dá)及其在卡拉膠寡糖制備中的應(yīng)用，并對(duì)得到的卡拉膠寡糖進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征以及體外降脂效果分析。通過基因克隆和異源表達(dá)，成功獲得電泳純的重組酶Cgk483，其分子質(zhì)量為35.89 kDa，純化后的酶活力提升10 倍，達(dá)到489.88 U/mg。酶學(xué)性質(zhì)研究表明，重組酶Cgk483的最適反應(yīng)溫度和pH值分別為40 ℃和8.0，在40 ℃以下和pH 5.0～10.0范圍內(nèi)具有較好穩(wěn)定性，F(xiàn)e2＋、Na＋和Ba2＋能提升重組酶Cgk483的活性。利用重組酶Cgk483成功制備得到κ-卡拉膠寡糖，由新卡拉二糖、新卡拉四糖和新卡拉六糖組成。結(jié)構(gòu)分析顯示酶解未破壞其主鏈，但使其羥基等基團(tuán)暴露，提高了κ-卡拉膠寡糖的溶解性。體外降脂研究表明，κ-卡拉膠寡糖能顯著抑制氧化型低密度脂蛋白引起的RAW264.7巨噬細(xì)胞泡沫化，減少脂質(zhì)蓄積。本研究制備了高效制備κ-卡拉膠寡糖的工具酶，并揭示了其酶解產(chǎn)物在降脂方面的應(yīng)用潛力，可為κ-卡拉膠寡糖的高效制備及動(dòng)脈粥樣硬化防治拓展新思路。
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