食源性抗氧化肽由于抗氧化能力較好、安全性高,逐漸成為多肽研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)以H2O2誘導(dǎo)HEK293細(xì)胞損傷建立氧化損傷模型,研究了蛋清源活性肽WNWAD(Trp-Asn-Trp-Ala-Asp)及其結(jié)構(gòu)改造肽WNW(Trp-Asn-Trp)、WAD(Trp-Ala-Asp)、WN(Trp-Asn)對(duì)H2O2誘導(dǎo)損傷的HEK293細(xì)胞的存活率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、抗氧化酶活力及細(xì)胞因子白介素8(interleukin-8,IL-8)分泌的影響。結(jié)果表明:蛋清源活性肽對(duì)HEK293細(xì)胞存活率的影響極顯著(P<0.01),不同濃度蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN作用于氧化損傷的HEK293細(xì)胞后,其存活率明顯提高,呈現(xiàn)濃度依賴性;其中1.0 μmol/L蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN處理細(xì)胞后,存活率從損傷組的(48.0±2.4)%分別提高到(99.7±1.8)%、(69.4±3.2)%、(78.9±5.1)%、(72.1±3.6)%,與損傷組有極顯著性差異(P<0.01);H2O2誘導(dǎo)HEK293細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生,經(jīng)過活性肽預(yù)處理后細(xì)胞內(nèi)ROS的水平極顯著降低(P<0.01);隨著蛋清源活性肽WNWAD、WNW、WAD、WN濃度的升高,總超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和谷胱甘肽過氧化物酶3 種酶的活力均有所提高,呈現(xiàn)濃度依賴型關(guān)系。最后利用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒測(cè)定了HEK293細(xì)胞中IL-8的分泌量,經(jīng)過H2O2處理的HEK293細(xì)胞上清液中IL-8含量極顯著升高(P<0.01),加入WNWAD、WNW、WN、WAD后,細(xì)胞中的IL-8含量均有所降低,其中WNWAD和WN影響顯著(P<0.05)。以上結(jié)果顯示蛋清源活性肽對(duì)降低HEK293細(xì)胞氧化應(yīng)激水平和提高細(xì)胞抗氧化能力有積極的影響。
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