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基于細(xì)胞膜損傷的蔗糖月桂酸酯對金黃色葡萄球菌的作用機(jī)制
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 162 發(fā)表時間: 2019-06-11
作者: 寧亞維,楊 坤,何建卓,張 巖,李 強(qiáng),王志新,賈英民
關(guān)鍵詞: 蔗糖月桂酸酯;金黃色葡萄球菌;細(xì)胞膜;流式細(xì)胞術(shù);透射電子顯微鏡
摘要:

研究蔗糖月桂酸酯對金黃色葡萄球菌的抑菌活性及其對細(xì)胞膜的損傷機(jī)制。首先采用二倍稀釋法考察了蔗糖月桂酸酯對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度,用平板計數(shù)法繪制了時間-殺菌曲線;通過DiSC3(5)探針標(biāo)記熒光分光光度法考察了蔗糖月桂酸酯對菌體細(xì)胞膜電勢差的影響,使用熒光顯微鏡結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)研究了菌體細(xì)胞膜滲透性的影響,使用紫外分光光度法考察了大分子物質(zhì)的泄漏情況,使用PBFI鉀離子探針測定了胞內(nèi)鉀離子泄漏量,最后通過透射電子顯微鏡觀察了蔗糖月桂酸酯處理前后菌體的超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明:蔗糖月桂酸酯對金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)為0.312 5 mg/mL;經(jīng)蔗糖月桂酸酯作用的金黃色葡萄球菌與對照組相比,DiSC3(5)探針的熒光強(qiáng)度呈現(xiàn)劑量依賴性增大;PI探針對菌體的沾染率增加,MIC處理30 min菌體PI沾染率達(dá)到84.7%;260 nm波長處的吸光度隨作用時間的延長逐漸增大,但增大量較小;蔗糖月桂酸酯會導(dǎo)致金黃色葡萄球菌細(xì)胞鉀離子泄漏,且泄漏量與添加的蔗糖月桂酸酯質(zhì)量濃度呈正相關(guān);經(jīng)MIC蔗糖月桂酸酯作用1 h后,金黃色葡萄球菌體表面變粗糙,邊緣模糊。結(jié)論:蔗糖月桂酸酯可以通過破壞細(xì)胞膜滲透性消散細(xì)胞膜電勢,從而導(dǎo)致胞內(nèi)物質(zhì)發(fā)生輕微泄漏,最終達(dá)到抑菌作用,本研究可為多功能性糖酯抑菌產(chǎn)品的開發(fā)提供理論依據(jù)。

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