領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
摘 要：建立一種重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（recombinase polymerase amplification，RPA）檢測沙門氏菌（Salmonella）的方法。本研究依據(jù)沙門氏菌侵襲蛋白A基因（invA）的保守序列設(shè)計特異性引物，通過對反應(yīng)時間的優(yōu)化，建立的RPA方法在38?℃水浴鍋中恒溫反應(yīng)20?min，即可實現(xiàn)對目的片段的有效擴(kuò)增；除沙門氏菌外，其他26?種食源性致病菌均無擴(kuò)增，具有良好的特異性；以沙門氏菌基因組DNA作為模板，該方法的檢測靈敏度為1.1×10－3?ng/μL，與本研究應(yīng)用的實時熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（real-time polymerase chain reaction，PCR）方法一致；人工污染實驗表明，當(dāng)羊肉、雞肉和西蘭花樣品污染量為4?CFU/25?g，增菌8?h，即可通過RPA方法檢出沙門氏菌。在人工污染實驗中，RPA和PCR檢測結(jié)果一致。本研究建立的沙門氏菌的RPA檢測方法特異性強、操作簡單、為食源性致病菌的鑒定提供了一種新的方向。
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