超聲波參數(shù)中,超聲頻率是影響蛋白酶解的主要因素。因此,本實(shí)驗(yàn)以不同模式超聲頻率下得到的蓮子蛋白酶解物為研究對(duì)象,首先對(duì)不同模式超聲進(jìn)行優(yōu)化,以血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率和水解度為指標(biāo),得出了不同模式下的最優(yōu)頻率參數(shù):?jiǎn)晤l率超聲20 kHz、雙頻率組合20/35 kHz、三頻率超聲組合20/35/50 kHz。然后采用表面疏水性、氨基酸分析及內(nèi)源性熒光光譜等表征不同模式的超聲預(yù)處理對(duì)蓮子蛋白酶解物及結(jié)構(gòu)特征影響。結(jié)果顯示:隨著超聲頻率組合增多,表面疏水性越來(lái)越大,疏水性氨基酸含量增多,主要是由于超聲預(yù)處理使蛋白結(jié)構(gòu)展開,使最初被掩埋在蛋白分子內(nèi)部的疏水基團(tuán)暴露。通過(guò)熒光光譜發(fā)現(xiàn),超聲預(yù)處理提高了蓮子蛋白的熒光強(qiáng)度,且熒光強(qiáng)度順序?yàn)槿l>雙頻>單頻;同時(shí),蓮子蛋白酶解物λmax發(fā)生輕微的紅移現(xiàn)象。上述結(jié)果對(duì)于蓮子蛋白酶解及ACE抑制肽的制備至關(guān)重要。
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