以高溫豆粕為原料,采用超聲輔助酶解法制備抗氧化產(chǎn)物。通過(guò)單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化,確定超聲波輔助酶解處理高溫豆粕的最佳工藝條件。超聲波同步纖維素酶酶解,最佳條件為超聲功率300?W、超聲時(shí)間20?min、底物質(zhì)量濃度8.36?g/100?mL、纖維素酶添加量666?U/g、酶解pH?4.1,得到的初步產(chǎn)物中可溶性多肽質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(18.51±0.36)%,可溶性多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(10.83±0.32)%。然后將其水解物進(jìn)一步用堿性蛋白酶水解,最佳條件為蛋白酶添加量61?900?U、酶解pH?9、酶解時(shí)間3?h、酶解溫度56.4?℃,其產(chǎn)物可溶性多肽質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(25.47±0.81)%,可溶性多糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為(13.22±0.49)%。按照最佳工藝條件對(duì)超聲復(fù)合酶解處理后的高溫豆粕產(chǎn)物進(jìn)行乙醇沉淀、DEAE-Cellulose52離子交換層析以及SephadxeG-25凝膠色譜層析分離純化,同時(shí),對(duì)分離純化后的各產(chǎn)物進(jìn)行抗氧化活性檢測(cè),最終獲得高溫豆粕抗氧化產(chǎn)物,得率為2.18%,并且當(dāng)產(chǎn)物質(zhì)量濃度為1?mg/mL時(shí),其鐵離子還原力和超氧陰離子自由基清除能力分別為(0.495±0.042)mmol/g和(17.02±0.22)U/g。
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