目的:鱈魚皮膠原蛋白肽(cod skin collagen peptide,CSCP)對肝損傷具有較好的保護作用,但其吸收機制尚不明確,本實驗擬采用人結腸腺癌Caco-2細胞單層模型對CSCP在腸道中的吸收機制進行研究,為CSCP在動物腸道內(nèi)的吸收機制提供依據(jù)。方法:在進行轉運實驗前,先對CSCP在人工胃、腸液、不同pH值條件及在Caco-2細胞單層中的穩(wěn)定性進行評價;采用CCK-8(cell counting kit-8)法確定CSCP在轉運實驗中的最高質量濃度,然后建立Caco-2細胞單層模型并測定跨膜電阻值和堿性磷酸酶活力以檢驗細胞單層的致密性、完整性和極化現(xiàn)象;考察轉運時間、CSCP質量濃度、維拉帕米、MK-571、氧化苯砷和去氧膽酸鈉對轉運的影響,利用高效液相色譜法檢測CSCP質量濃度并計算累積轉運量和表觀滲透系數(shù)。結果:在3 h內(nèi),CSCP在人工胃、腸液及接近胃腸道pH值環(huán)境中基本保持穩(wěn)定,轉運過程中未見多肽發(fā)生水解。CSCP的轉運具有時間和濃度依賴性,不受維拉帕米和氧化苯砷的影響,去氧膽酸鈉和MK-571對CSCP的轉運具有非常顯著的促進作用(P<0.05)。結論:CSCP跨Caco-2細胞單層轉運的機制為細胞旁路途徑,其外排受到多藥耐藥蛋白的介導。
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