用膜分離和XAD-4大孔吸附樹脂分離得到純化蘿卜花青素,經(jīng)紅外光譜和質(zhì)譜分析表明其主要成分為蘿卜花青素雙糖苷,在4?℃冷水和65%乙醇溶液中的溶解率僅為46.43%和63.07%。以純化蘿卜花青素為起始原料,進(jìn)行葡萄糖苷酶修飾,探討pH值、葡萄糖苷酶/蘿卜花青素質(zhì)量比、反應(yīng)溫度對(duì)制備蘿卜花青素酶修飾物的影響,確定了糖苷酶修飾蘿卜花青素的工藝條件,并用正交試驗(yàn)法對(duì)其工藝條件進(jìn)行優(yōu)化。紅外光譜和質(zhì)譜分析表明,葡萄糖苷酶修飾蘿卜花青素的水解反應(yīng)具有高度專一性,蘿卜花青素雙糖苷中的糖苷鍵被成功水解,生成的蘿卜花青素酶修飾物為蘿卜花青素單糖苷。通過(guò)糖苷酶的修飾,蘿卜花青素的冷水可溶性得到了明顯地改善,修飾后的蘿卜花青素在4?℃冷水和65%乙醇溶液中的溶解率分別提高115.38%和58.55%。采用溴鄰苯三酚紅氧化法的抗氧化能力分析表明,通過(guò)糖苷酶的修飾,蘿卜花青素抗氧化能力得到明顯提高,蘿卜花青素酶修飾物對(duì)羥自由基的清除能力明顯高于蘿卜花青素,但是略低于原花青素B2。而且蘿卜花青素酶修飾物可抑制人體肝癌細(xì)胞MHCC97L的生長(zhǎng),用濃度為5~40?μmol/L的蘿卜花青素酶修飾物處理人體肝癌細(xì)胞MHCC97L?24~72?h,均可顯著抑制該細(xì)胞的生長(zhǎng),抑制率隨其劑量增加而增大。???
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