單核細(xì)胞增生李斯特菌(簡稱單增李斯特菌)作為一種常見的食源性致病菌,是影響果汁食用安全性的主要威脅因子。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并獲得一種抗菌肽zp37,通過測定抗菌肽zp37最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC),分析抗菌肽zp37處理后單增李斯特菌的生長曲線、膜電位、膜完整性、細(xì)胞微觀結(jié)構(gòu)、細(xì)胞聚集率、DNA結(jié)合情況以及胞內(nèi)活性氧等,研究抗菌肽zp37抑制果汁中單增李斯特菌的活性及其作用機(jī)制。結(jié)果表明,抗菌肽zp37對單增李斯特菌的MIC為16 μg/mL,當(dāng)其質(zhì)量濃度大于4 MIC時(shí),單增李斯特菌生長受到明顯抑制。同時(shí),8 MIC的抗菌肽zp37處理1 h能殺死絕大部分的單增李斯特菌,且在7 d貯藏期內(nèi),2 MIC的抗菌肽zp37能將草莓汁、獼猴桃汁和蘋果汁中的單增李斯特菌控制到檢測限以下。抗菌肽zp37處理后,單增李斯特菌細(xì)胞膜離子通透性增加、膜電位消失,細(xì)胞膜完整性被破壞,細(xì)胞出現(xiàn)明顯的凹陷變形,細(xì)胞間發(fā)生聚集。熒光標(biāo)記示蹤法結(jié)果顯示,抗菌肽zp37同時(shí)作用于單增李斯特菌的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。在細(xì)胞質(zhì)中,當(dāng)抗菌肽zp37質(zhì)量濃度大于DNA質(zhì)量濃度的1/4時(shí),兩者會發(fā)生明顯結(jié)合甚至導(dǎo)致DNA沉淀。此外,抗菌肽zp37能誘導(dǎo)單增李斯特菌產(chǎn)生活性氧,且與質(zhì)量濃度成正比。綜上,抗菌肽zp37對果汁中的單增李斯特菌抑制效果明顯,本研究可為抗菌肽作為生物防腐劑應(yīng)用于果汁提供一定的科學(xué)依據(jù)。
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