建立一種基于流式分析技術(shù)的快速定量檢測牛乳中大腸桿菌O157:H7的方法。用偶聯(lián)有異硫氰酸熒光素的大腸桿菌O157單克隆抗體對大腸桿菌O157:H7進行特異性標記,通過優(yōu)化抗體反應(yīng)條件,建立流式檢測方法,然后對磷酸鹽緩沖溶液(phosphate buffer saline,PBS)和人工污染牛乳樣品中不同濃度的大腸桿菌O157:H7進行定量檢測。本研究建立的流式檢測方法的在PBS中的檢測范圍為2.57×103~1.12×108?CFU/mL,靈敏度達到2.57×103?CFU/mL。將所建立的流式檢測方法應(yīng)用于牛乳樣品檢測,當人工污染牛乳樣品中大腸桿菌O157:H7的濃度在2.31×104~1.48×108?CFU/mL之間時,流式檢測方法與平板計數(shù)方法檢測結(jié)果基本一致,方法的靈敏度為2.31×104?CFU/mL,檢測時間為35?min。該方法能快速、定量地檢測出牛乳樣品中的大腸桿菌O157:H7,在食源性致病菌的快速篩查和監(jiān)控中具有重要的應(yīng)用價值。
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