確定使用酶-3,5-二硝基水楊酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法作為酵母胞內(nèi)海藻糖定量測(cè)定方法,通過微波-浸提法對(duì)活性干酵母胞內(nèi)海藻糖進(jìn)行提取,采用單因素試驗(yàn)以酵母中海藻糖含量為參考指標(biāo)優(yōu)化該工藝中的微波功率、微波時(shí)間、三氯乙酸濃度、三氯乙酸體積、浸提溫度、浸提時(shí)間,在此基礎(chǔ)上對(duì)微波功率、微波時(shí)間、三氯乙酸濃度、三氯乙酸體積、浸提溫度5?個(gè)因素進(jìn)行正交試驗(yàn),優(yōu)化后工藝條件為:針對(duì)1.5?g活性干酵母,微波功率231?W、微波時(shí)間40?s、三氯乙酸濃度0.7?mol/L、三氯乙酸體積40?mL、浸提溫度55?℃、浸提時(shí)間150?min。使用該工藝得到的活性干酵母中的海藻糖含量為280.15?mg/g,相對(duì)于優(yōu)化前提高了15.2%。同時(shí),利用該優(yōu)化后工藝在現(xiàn)有面包酵母菌種中篩選出了一株高產(chǎn)海藻糖的菌株。在50?L自吸式發(fā)酵罐中將該菌株進(jìn)行流加發(fā)酵,采用糖蜜進(jìn)行溶氧反饋流加時(shí)最大酵母濕質(zhì)量濃度為198.34?g/L,將流加工藝進(jìn)行改進(jìn),提出稱質(zhì)量補(bǔ)料的流加方法將糖蜜、尿素、磷酸二氫銨作為流加營養(yǎng)源,實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)發(fā)酵后最大酵母濕質(zhì)量濃度可提高到264.82?g/L,相對(duì)于原工藝提高了33.52%,達(dá)到了面包酵母高密度培養(yǎng)的要求。發(fā)酵過程中將乙醇體積分?jǐn)?shù)控制在0.7%~1.0%之間,將有效提高酵母濕質(zhì)量濃度且保證其發(fā)酵力在650?mL/h以上,且工藝穩(wěn)定性良好。
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