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蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus LJ01中亞硝酸鹽還原酶的基因克隆、表達(dá)和純化
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 132 發(fā)表時間: 2019-09-26
作者: 陳思敏,羅彤暉,費(fèi)永濤,吳健鋒,劉冬梅
關(guān)鍵詞: 亞硝酸鹽還原酶|蠟樣芽孢桿菌|基因克隆|蛋白表達(dá)|工程菌
摘要:

利用克隆表達(dá)技術(shù),對一種蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus LJ01的亞硝酸鹽還原酶(nitrite reductase,NiR)基因進(jìn)行克隆、原核表達(dá),利用Ni柱親和層析和DEAE Sepharose Fast Flow交換層析對表達(dá)的重組NiR進(jìn)行純化,分析重組酶的性質(zhì)。研究結(jié)果顯示,該NiR含有一個1?623?bp的開放閱讀框,編碼540?個氨基酸序列,重組NiR的分子質(zhì)量約為67?ku;該酶中同時存在鐵離子和銅離子,且含量分別為51.0?mg/kg和184.5?mg/kg;圓二色譜結(jié)果顯示α-螺旋結(jié)構(gòu)在重組NiR中所占比例最大。

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