目的:觀察蓮心總堿(total alkaloids from the seed embryo of Nelumbo nucifera,TAENN)對(duì)脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)/D-氨基半乳糖(D-galactosamine,GalN)誘導(dǎo)急性肝衰竭小鼠肝臟炎癥反應(yīng)的影響。 方法:將昆明小鼠40 只隨機(jī)分為4 組(正常對(duì)照組、模型組和TAENN高、低劑量組),每組10 只。TAENN高、 低劑量組的給藥劑量分別為100、30 mg/kg,給藥途徑為灌胃,每日給藥1 次。正常對(duì)照組和模型組灌胃等體積生 理鹽水。給藥結(jié)束后,模型組和TAENN高、低劑量組小鼠腹腔注射LPS/GalN建立小鼠急性肝衰竭模型。用酶聯(lián)免 疫吸附測(cè)定法檢測(cè)腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、 IL-6和前列腺素E2(prostaglandine E2,PGE2)水平。用Griess法檢測(cè)肝組織中一氧化氮(nitric oxide,NO)的含 量。用實(shí)時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)法檢測(cè)小鼠肝組織中TNF-α、IL-1β、IL-6、誘導(dǎo)型 一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、環(huán)氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的mRNA的表達(dá) 水平。用免疫印跡法檢測(cè)小鼠肝組織中iNOS、COX-2蛋白表達(dá)和核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear transcription factor-κB, NF-κB)p65亞基磷酸化水平。結(jié)果:與模型組相比,TAENN組小鼠血清與肝臟中炎癥因子TNF-α、IL-1β和IL-6水 平明顯降低(P<0.01)。肝臟中炎癥介質(zhì)NO和PGE2水平亦有極顯著下降(P<0.01)。經(jīng)TAENN處理后,模型小 鼠肝臟中TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS、COX-2等的mRNA表達(dá)水平明顯下降(P<0.01)。此外,iNOS和COX-2的 蛋白表達(dá)水平明顯降低(P<0.01),p65蛋白本身的表達(dá)水平不變,但其536位絲氨酸的磷酸化水平亦極顯著下降 (P<0.01)。結(jié)論:TAENN對(duì)LPS/GalN誘導(dǎo)小鼠急性肝衰竭相關(guān)的炎癥反應(yīng)具有明顯的保護(hù)作用,其機(jī)制可能與 抑制NF-κB信號(hào)通路并減少炎癥因子和炎癥介質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)有關(guān)。
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