領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國(guó)食品雜志社
目的：考察小檗堿對(duì)油酸所致內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用，并探究其作用機(jī)制。方法：以體外培養(yǎng)人主動(dòng) 脈內(nèi)皮細(xì)胞系（human aorta endothelial cells，HAEC）為受試對(duì)象；分別以油酸、油酸聯(lián)合小檗堿、油酸聯(lián)合單 磷酸腺苷活化蛋白激酶（adenosine monophosphate-activated protein kinase，AMPK）激活劑（AICAR）或抑制劑 （Compound C）處理HAEC；采用油紅O染色法觀(guān)察細(xì)胞內(nèi)脂滴合成；采用比色法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯、總膽 固醇含量，硝酸還原酶法檢測(cè)NO的水平，2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽探針檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)總活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平，Western Blotting檢測(cè)細(xì)胞總AMPK、內(nèi)皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase， eNOS）及其磷酸化（p-AMPK、p-eNOS）水平。結(jié)果：油酸可濃度依賴(lài)性地抑制細(xì)胞增殖，小檗堿組各項(xiàng)指標(biāo) 較正常對(duì)照組無(wú)顯著性差異，油酸聯(lián)合小檗堿組的細(xì)胞活性較油酸組明顯好轉(zhuǎn)（P＜0.01）。與正常對(duì)照組比較， 油酸組的脂質(zhì)浸潤(rùn)程度明顯，油酸在不同濃度下使內(nèi)皮細(xì)胞的脂質(zhì)含量呈劑量依賴(lài)性增加，加入小檗堿可明顯減 少這種脂質(zhì)堆積。油酸組的NO水平較正常對(duì)照組明顯減少，小檗堿能顯著抑制油酸所致的內(nèi)皮NO水平的減少， 并且減少由于油酸所致的ROS水平的升高；油酸抑制了AMPK的活化，使p-AMPK和p-eNOS的蛋白水平明顯降低 （P＜0.01）；小檗堿可明顯逆轉(zhuǎn)油酸所致AMPK和eNOS磷酸化水平下降，Compound C可拮抗其作用。結(jié)論：小檗 堿可減輕油酸所致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，或與其活化AMPK/eNOS信號(hào)相關(guān)。
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