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白扁豆多糖對(duì)神經(jīng)細(xì)胞缺氧性凋亡的保護(hù)機(jī)制
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 152 發(fā)表時(shí)間: 2019-09-26
作者: 張賢益,李文娟,鐘 亮,潘 猛,湯小芳,姚于飛
關(guān)鍵詞: 白扁豆多糖|神經(jīng)細(xì)胞|缺氧/復(fù)氧|凋亡作用|PI3K-Akt信號(hào)通路
摘要:

目的:模擬體內(nèi)環(huán)境,研究白扁豆多糖(dolichos bean seed polysaccharide,DBSP)對(duì)胎鼠大腦 皮層神經(jīng)細(xì)胞缺氧性凋亡的保護(hù)機(jī)制。方法:原代培養(yǎng)胎鼠大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞;建立缺氧/復(fù)氧(anoxia/ reoxygenation,A/R)損傷模型;實(shí)驗(yàn)分4 組:對(duì)照組、A/R組、白扁豆多糖預(yù)處理組(DBSP+A/R組)、阻斷劑組 (LY294002+DBSP+A/R組);用比色法檢測(cè)細(xì)胞活性與乳酸脫氫酶的釋放水平;流式細(xì)胞儀分析測(cè)定Ca2+ 相對(duì)濃度、活性氧、線粒體膜電位和細(xì)胞凋亡的變化;Western blot法檢測(cè)總蛋白激酶B(total protein kinase B, T-Akt)和磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)蛋白表達(dá)。結(jié)果:從細(xì)胞活性來看,A/R組比 對(duì)照組明顯降低(P<0.01),表明A/R對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生了損傷。同時(shí),與A/R組相比,DBSP+A/R組細(xì)胞活性顯著 上升、細(xì)胞凋亡明顯減少(P<0.01),乳酸脫氫酶的釋放水平下降,表明DBSP對(duì)受A/R損傷的神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù) 作用,進(jìn)一步結(jié)果顯示,與A/R組相比,DBSP+A/R組中Ca2+相對(duì)濃度和活性氧生成顯著降低、顯著增加線粒體膜 電位和p-Akt蛋白表達(dá)(P<0.01)。而與DBSP+A/R組相比,LY294002+DBSP+A/R組中p-Akt蛋白表達(dá)顯著減少 (P<0.01),同時(shí)細(xì)胞活性與線粒體膜電位下降,且LDH的釋放水平、Ca2+相對(duì)濃度、活性氧、細(xì)胞凋亡明顯增加 (P<0.05),表明DBSP對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用受到PI3K-Akt信號(hào)通路抑制劑LY294002的抑制作用而被削弱。結(jié) 論:DBSP可通過PI3K-Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抑制神經(jīng)細(xì)胞的缺氧性凋亡。

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