為探究副溶血性弧菌生物被膜形成機(jī)制,在菌株生理特性分析的基礎(chǔ)上,結(jié)合轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù),對(duì)生物被膜形成過(guò)程中的基因表達(dá)調(diào)控規(guī)律進(jìn)行探究。實(shí)驗(yàn)測(cè)定了2 株被膜差異菌株(ATCC 17802和VP-0)的胞外多糖、胞外蛋白、信號(hào)分子AI-2、細(xì)胞滲透性和生物被膜微觀形態(tài)等生理指標(biāo),研究被膜差異菌株的動(dòng)態(tài)形成過(guò)程。結(jié)果顯示:供試菌株生物被膜形成過(guò)程,0~12 h為可逆黏附階段,12~48 h為不可逆黏附和微菌落形成階段,48~72 h為成熟階段,72~144 h為解離階段。ATCC 17802胞外多糖和蛋白在生物被膜成熟期分泌量分別是VP-0的1.67 倍和2.3 倍,在生物被膜形成過(guò)程中信號(hào)分子含量相差不顯著(P>0.05),激光共聚焦顯微鏡顯示ATCC 17802呈現(xiàn)更聚集狀態(tài)。根據(jù)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果分析可知,3 個(gè)處理組(72 h vs 8 h、48 h vs 8 h和72 h vs 48 h)分別鑒別出802、1 061 個(gè)和267 個(gè)顯著性差異表達(dá)基因,其中分別有506、655 個(gè)和96 個(gè)差異基因下調(diào),296、406 個(gè)和171 個(gè)差異基因上調(diào)。這些差異主要體現(xiàn)在能量代謝、鞭毛系統(tǒng)、轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)等與生物被膜形成有關(guān)的方面。本實(shí)驗(yàn)詳細(xì)劃分了副溶血性弧菌生物被膜的形成階段,也為生物被膜動(dòng)態(tài)調(diào)控中的基因調(diào)控過(guò)程提供了理論基礎(chǔ)。
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