目的:研究末水壇紫菜多糖的除蛋白方法及所制備多糖在細胞內(nèi)的抗氧化作用。方法:響應(yīng)面法優(yōu)化末水壇紫菜多糖酶法除蛋白工藝條件;建立H2O2誘導(dǎo)HeLa細胞氧化損傷模型,MTT法測定細胞存活率,2′,7′-二氯熒光素二乙酸酯檢測細胞內(nèi)活性氧水平。結(jié)果:樣品液中末水壇紫菜多糖酶法除蛋白最佳工藝條件為木瓜蛋白酶用量0.7 mg/mL、酶解溫度50 ℃、酶解時間55 min,此時蛋白清除率為61.28%;在此基礎(chǔ)上,用4%三氯乙酸繼續(xù)除蛋白,蛋白清除率可達80.73%,多糖保留率為79.7%。與模型組相比,經(jīng)末水壇紫菜多糖處理的損傷細胞存活率顯著提高(P<0.01),且細胞內(nèi)活性氧含量顯著下降(P<0.01)。結(jié)論:木瓜蛋白酶-三氯乙酸聯(lián)用可有效除去末水壇紫菜多糖中的蛋白。末水壇紫菜多糖有較強的抗氧化能力,能清除細胞內(nèi)過剩的活性氧,修復(fù)H2O2對HeLa細胞的氧化損傷。
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