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雜優(yōu)-2平菇漆酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 166 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 廖海君,李蕊伽,陶 敏,白亞娟,唐 菁,唐云明
關(guān)鍵詞: 雜優(yōu)-2平菇;漆酶;分離純化;酶學(xué)性質(zhì)
摘要:

將雜優(yōu)-2平菇菌絲進(jìn)行液體培養(yǎng),發(fā)酵液經(jīng)硫酸銨分級沉淀、DEAE(diethylaminoethyl)-Sepharose fastflow層析和Superdex-200 prep grade層析等方法純化,獲得了電泳純的雜優(yōu)-2平菇漆酶,并對純化的漆酶進(jìn)行了部分酶學(xué)性質(zhì)研究。結(jié)果顯示,雜優(yōu)-2平菇漆酶比活力為115 U/mg,分子質(zhì)量約為244.0 kD,亞基分子質(zhì)量約為85.6 kD。最適反應(yīng)pH值和最適反應(yīng)溫度分別為5.0和55 ℃,在pH 6.0~8.0及40~55 ℃范圍內(nèi)穩(wěn)定性較好;最適條件下,以2,2’-聯(lián)氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)為底物的Km值為2.1 mmol/L,最大反應(yīng)速率(vmax)為0.117 μmol/(min·L)。Fe2+、抗壞血酸對該酶活性具有完全抑制作用,乙二胺四乙酸、Ag+、Mg2+、Li+對該酶活性影響較小;草酸、甲醇、正丁醇、K+、Ca2+、Ba2+、Zn2+、Cd2+、Pb2+、Mn2+、Co2+對該酶活性有不同程度的抑制作用;Cu2+激活作用不明顯;尿素、乙醇、異丙醇對該酶活性具有激活作用。

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