目的:采用熒光分光光度法研究了一磷酸腺苷(adenosine 5’-monophosphate,AMP)與肌動球蛋白相互作用的情況。方法:根據(jù)分子間的相互作用力與相關熱力學參數(shù)間的關系,結合AMP與肌動球蛋白相互作用的焓變和熵變,討論AMP對肌動球蛋白熒光的猝滅機理,測定AMP與肌動球蛋白的猝滅常數(shù)、結合常數(shù)和作用力類型,考察AMP對肌動球蛋白構象的影響。結果:Western blotting證明了不同濃度AMP對肌動球蛋白解離的促進作用;AMP與肌動球蛋白結合反應中δG<0,δH>0,δS>0,兩者之間結合主要通過疏水相互作用,且AMP的存在使得肌動球蛋白的構象發(fā)生變化,疏水環(huán)境極性降低;熒光光譜分析表明AMP與肌動球蛋白的結合使肌動球蛋白內(nèi)源熒光發(fā)生了有規(guī)律的猝滅,298 K和313 K溫度條件下AMP與肌動球蛋白的靜態(tài)猝滅常數(shù)分別為8.70×102、4.07×102 L/mol,結合常數(shù)KLB分別為9.253×102 L/mol和3.142×102 L/mol。結論:AMP通過疏水相互作用力和肌動球蛋白形成復合物,從而促進肌動球蛋白的解離。
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