采用鈦膠反相色譜柱,建立高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定5 種維生素:煙酸、生物素、煙酰胺、葉酸和鈷胺素含量的檢測(cè)方法。研究5 種維生素的保留行為與磷酸緩沖鹽pH值、緩沖鹽類(lèi)型及濃度、柱溫和流速的關(guān)系,得出了最優(yōu)色譜條件:于波長(zhǎng)210 nm處檢測(cè)生物素和鈷胺素,于波長(zhǎng)270 nm處檢測(cè)煙酸、煙酰胺和葉酸,磷酸鹽pH 7.0,濃度5.0 mmol/L,柱溫50 ℃,流速0.8 mL/min。分析5 種維生素保留的熱力學(xué)參數(shù)焓、熵和吉布斯自由能。煙酸、生物素、煙酰胺、葉酸和鈷胺素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性良好(R2>0.999 0);煙酸、生物素、煙酰胺、葉酸和鈷胺素的檢出限分別為6、10、20、22、8 ng/mL;5 種物質(zhì)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均低于1.36%;加標(biāo)回收率范圍為92.30%~107.20%。方法的精密度和準(zhǔn)確度均可滿(mǎn)足高效液相色譜法的測(cè)定要求。
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