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白姑魚胰蛋白酶的分離純化及其性質(zhì)分析
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 185 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 李 歡,李 婷,詹云超,杜翠紅
關(guān)鍵詞: 白姑魚;胰蛋白酶;分離純化;酶學(xué)性質(zhì)
摘要:

本研究從白姑魚幽門垂組織中提取胰蛋白酶粗酶,然后經(jīng)硫酸銨分級沉淀、DEAE-Sepharose Fast Flow陰離子交換層析及Sephacryl S-200凝膠過濾層析等分離純化技術(shù),得到一種陰離子型胰蛋白酶(命名為:Trypsin A),并對該陰離子型胰蛋白酶進行鑒定及性質(zhì)分析。結(jié)果表明:Trypsin A的分子質(zhì)量約為28 kD,其最適反應(yīng)溫度為50 ℃,能在低于65 ℃條件下保持穩(wěn)定;最適pH值為9.5,酸堿耐受范圍為pH 9.5~11.0;Western blotting分析表明,白姑魚陰離子型胰蛋白酶可以與抗鯽魚胰蛋白酶抗體反應(yīng),符合胰蛋白酶活性區(qū)域的高度保守性;絲氨酸類蛋白酶抑制劑對白姑魚胰蛋白酶具有抑制作用。

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