目的:腸毒素sek基因在臨床分離的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌菌株中較為流行,研究新型腸毒素sek基因的時(shí)序性表達(dá)可為食物中毒預(yù)防和疾病控制補(bǔ)充新的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。方法:本研究針對實(shí)驗(yàn)室保存的食源性金黃色葡萄球菌菌株進(jìn)行21 種腸毒素基因檢測,篩選出3 株含sek基因的菌株SA005、SA008和SAB0,針對3 株菌株進(jìn)行生長曲線測定,隨后在培養(yǎng)不同時(shí)間段收集菌體提取RNA,利用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(real time-polymerasechain reaction,real time-PCR)檢測腸毒素sek基因在12~120 h的相對表達(dá)水平。結(jié)果:基因檢測結(jié)果顯示,菌株SA005含有16S、nuc、mecA、seb、sec、sek、sex基因,SA008含有16S、nuc、mecA、sea、sek、sex基因,SAB0含有16S、nuc、sek、sex基因。3 株菌株在胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基中的生長曲線趨勢較相似,18 h左右出現(xiàn)折點(diǎn),之后細(xì)菌進(jìn)入生長穩(wěn)定期。3 株菌株的sek基因在12~120 h全程表達(dá),SA005的sek基因在48 h時(shí)相對表達(dá)量最高,在84 h相對表達(dá)量最低;SA008在24 h時(shí)的相對表達(dá)量最高,在48 h相對表達(dá)量最低,在60~120 h表達(dá)量相對比較穩(wěn)定;SAB0在12~120 h之間相對表達(dá)量呈現(xiàn)拋物線趨勢,在60 h和72 h的表達(dá)量相對較高且差異不顯著(P>0.05)。結(jié)論:3 株菌株sek表達(dá)水平存在明顯差異,相同菌株sek基因不同時(shí)間點(diǎn)表達(dá)也存在差異性,菌株基因背景的影響可能是造成sek基因表達(dá)差異性的關(guān)鍵。
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