探討苦丁冬青苦丁茶中咖啡酰奎尼酸(caffeoylquinic acids,CQA):3-CQA、4-CQA、5-CQA、3,4-diCQA、3,5-diCQA和4,5-diCQA對(duì)α-淀粉酶的體外抑制活性,并采用熒光光譜法和圓二色譜法分析CQA與α-淀粉酶的相互作用特性,使用修正后的Stern-Volmer方程與van’t Hoff方程探討CQA-酶之間的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)及熱力學(xué)參數(shù)。結(jié)果表明:3-CQA、4-CQA、5-CQA、3,4-diCQA、3,5-diCQA和4,5-diCQA對(duì)α-淀粉酶均有較強(qiáng)的抑制作用,半抑制濃度(IC50)分別為1.54、1.05、1.28、0.96、0.33、0.64 mg/mL;CQA與α-淀粉酶發(fā)生結(jié)合反應(yīng),生成穩(wěn)定的復(fù)合物,從而造成酶分子內(nèi)部熒光發(fā)生猝滅;熱力學(xué)參數(shù)分析表明CQA與α-淀粉酶主要靠疏水作用力結(jié)合,反應(yīng)自發(fā)進(jìn)行。此外,圓二色譜結(jié)果顯示CQA的結(jié)合引起α-淀粉酶二級(jí)結(jié)構(gòu)的變化,破壞了酶蛋白的天然構(gòu)象,從而降低了酶的催化活性。
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