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菠蘿蜜過氧化物酶活性部位的研究
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 134 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 陶毅明,金榮仲,朱 華,馬義麗,劉青波
關(guān)鍵詞: 過氧化物酶;菠蘿蜜;酶活中心;必需基團(tuán);化學(xué)修飾
摘要:

以菠蘿蜜果肉過氧化物酶(peroxidase,POD)為研究對象,用丁二酮、碳化二亞胺(N-ethyl-N’-3-dimethylaminopropyl carbodiimide,EDC)、N-乙酰咪唑(N-acetylimidazole,NAI)、β-巰基乙醇(β-mercaptoethanol,MT)、對-氯汞苯甲酸(parachloro-mercuri-benzoate,pCMB)和焦碳酸二乙酯(diethylpyrocarbonate,DEPC)對POD進(jìn)行化學(xué)修飾,研究酶活性必需基團(tuán)。結(jié)果表明,丁二酮、EDC和NAI對酶活力無顯著影響,說明精氨酸、羧基和酪氨酸與酶活力無關(guān);pCMB、DEPC和β-巰基乙醇強(qiáng)烈抑制酶活性,說明半胱氨酸和組氨酸是酶活性的必需基團(tuán),二硫鍵對酶活性有重要貢獻(xiàn)。動力學(xué)分析和底物保護(hù)實(shí)驗(yàn)表明,DEPC為POD的競爭性抑制劑,組氨酸位于酶活中心。

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