采用超聲波與高壓均質(zhì)破碎細胞,通過顯微觀察細胞破碎效果、Bradford法測定蛋白含量并進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析,比較了三羥甲基氨基甲烷(tris(hydroxymethyl)methyl aminomethane,Tris)-飽和酚法、三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)-丙酮沉淀法及Tris-飽和酚結(jié)合TCA-丙酮沉淀法提取銀耳芽孢總蛋白的效果。結(jié)果表明:高壓均質(zhì)的細胞破碎效果優(yōu)于超聲波,3 種方法所得到的銀耳芽孢總蛋白質(zhì)量濃度分別為2.33、1.26、1.02 mg/mL,且Tris-飽和酚法經(jīng)傳統(tǒng)考馬斯亮藍染色法染色所得電泳條帶亮度及清晰度均優(yōu)于其他兩種方法。因此,Tris-飽和酚法是進行銀耳芽孢總蛋白提取的一種有效方法。
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