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D-乳糖醇代替異丙基-β-D-巰基半乳糖苷對重組蛋白誘導(dǎo)表達的影響
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 115 發(fā)表時間: 2017-06-07
作者: 畢云楓,姜仁鳳,何 舒,任大勇,徐琳琳,沈明浩
關(guān)鍵詞: α-葡萄糖苷酶;誘導(dǎo);響應(yīng)面;D-乳糖醇
摘要:

目的:用D-乳糖醇代替異丙基-β-D-巰基半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)作為誘導(dǎo)劑,誘導(dǎo)重組葡萄糖苷酶的表達。方法:首先通過單因素試驗探討D-乳糖醇濃度、誘導(dǎo)時間及誘導(dǎo)溫度對重組葡萄糖苷酶表達的影響,從而確定最佳影響因素的水平值,然后在單因素試驗的基礎(chǔ)上采用三因素三水平的響應(yīng)面法對重組葡萄糖苷酶表達進行優(yōu)化分析,依據(jù)回歸分析方法確定最佳誘導(dǎo)工藝條件。結(jié)果:最佳誘導(dǎo)工藝條件為D-乳糖醇的誘導(dǎo)終濃度1.0 mmol/L、誘導(dǎo)時間7.0 h、誘導(dǎo)溫度34 ℃。結(jié)論:D-乳糖醇可以代替IPTG作為一種高效的lac及其衍生物的啟動子基因工程重組蛋白的理想誘導(dǎo)劑。

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