從仿刺參體壁中分離純化出抗菌肽并研究其抑菌活性。以鮮活仿刺參體壁為原料,采用5%乙酸浸提法進(jìn)行粗提,以抑菌活性為指標(biāo)進(jìn)行分離。經(jīng)超濾系統(tǒng)超濾,大孔吸附樹脂柱層析分離純化,采用酶標(biāo)儀比濁法檢測各組分對大腸埃希氏菌(Escherichia coli)、腸炎沙門氏菌(Salmonella eternitidis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)的抑菌活性。采用Tricine-十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(Tricine-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,Tricine-SDS-PAGE)檢測抗菌肽分子質(zhì)量。結(jié)果表明:通過超濾分離,分別得到分子質(zhì)量<1、1~5 kD和5~10 kD組分,其中分子質(zhì)量<1 kD組分的抑菌活性最高,選用該組分繼續(xù)進(jìn)行大孔吸附樹脂柱層析分離,得抑菌活性最高的組分,其Tricine-SDS-PAGE結(jié)果表現(xiàn)為單一條帶,分子質(zhì)量約為4.35 kD。
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