領(lǐng)學(xué)術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
誘變篩選發(fā)酵玉米芯水解液高產(chǎn)蘋果酸的根霉屬菌株，并對其進(jìn)行代謝分析，研究其高產(chǎn)蘋果酸的機(jī)理。對分離得到的菌株進(jìn)行ITS序列鑒定，進(jìn)一步利用軟X射線輻射對菌種進(jìn)行誘變篩選、對出發(fā)菌株和突變菌株的相關(guān)酶活力進(jìn)行測定及代謝通量分析。利用軟X射線輻射結(jié)合丙烯醇平板篩選乙醇脫氫酶缺陷型菌株，得到突變株-1，發(fā)現(xiàn)其乙醇脫氫酶基因的3 處密碼子突變?yōu)椤癟AA”，阻斷了突變菌株的乙醇代謝途徑。進(jìn)而利用軟X射線輻射結(jié)合氟乙酸平板篩選乙醛酸循環(huán)缺陷型菌株，得到復(fù)合突變株-2，降低了副產(chǎn)物富馬酸及琥珀酸的產(chǎn)量。復(fù)合突變株-2的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶中幾處NADP（H）結(jié)合位點(diǎn)發(fā)生突變，增加了糖酵解和磷酸戊糖兩種途徑的相互作用，促進(jìn)了其戊糖代謝。經(jīng)過兩步分離篩選，得到的復(fù)合突變株-2能發(fā)酵玉米芯水解液高產(chǎn)蘋果酸，且減少了副產(chǎn)物乙醇、富馬酸、琥珀酸的生成。復(fù)合突變株-2的蘋果酸產(chǎn)量占代謝物總產(chǎn)量的比例由出發(fā)菌株的71%增加到91%，蘋果酸產(chǎn)量增大1 倍，研究成果對工業(yè)化利用突變菌株生產(chǎn)蘋果酸具有重要意義。
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