目的:建立AB-8大孔樹脂純化稠李花色苷的方法,并檢測稠李花色苷體外抗氧化活性。方法:通過AB-8大孔樹脂對(duì)稠李花色苷的動(dòng)態(tài)吸附與解吸條件優(yōu)化,確定最佳純化條件;采用四唑氮藍(lán)(nitroblue tetrazolium,NBT)光化還原法測定花色苷體外抗氧化活性,2’,7’-二氫二氯熒光素二乙酸酯(2’,7’-dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)法觀察花色苷對(duì)H2O2誘導(dǎo)的N2A細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用。結(jié)果:稠李花色苷的最佳動(dòng)態(tài)純化條件是:吸附流速0.01 mL/s,粗提液質(zhì)量濃度8 mg/mL,過柱次數(shù)2 次;解吸劑乙醇體積分?jǐn)?shù)70%,流速0.01 mL/s,pH 3,純化之后稠李花色苷的色價(jià)為57.1,純化了16.31 倍;NBT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,稠李花色苷具有清除超氧陰離子自由基的能力,且具有較好的劑量-效應(yīng)關(guān)系;0.025 mg/mL的稠李花色苷能夠保護(hù)H2O2損傷的N2A細(xì)胞,0.05 mg/mL的稠李花色苷能夠降低細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。結(jié)論:AB-8大孔樹脂是純化稠李花色苷的一種有效方法,稠李花色苷在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有較好的體外抗氧化活性。
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