應(yīng)用雙層平板打孔法,從自制櫻桃酒里分離的乳桿菌中篩選到一株對革蘭氏陽性細(xì)菌和革蘭氏陰性細(xì)菌均有明顯抑制作用的菌株,命名為LD 1.0008。通過API 50 CHL糖發(fā)酵產(chǎn)酸實驗、16S rDNA基因序列分析及其特異性recA基因多重聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR),鑒定LD 1.0008為植物乳桿菌。排除有機酸的干擾,用多種蛋白酶處理后,其抑菌活性均有明顯降低,而用過氧化氫酶處理后其抑菌活性基本不變,從而確定LD 1.0008所產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)為細(xì)菌素。使用已報道的10 對植物乳桿菌細(xì)菌素基因片段設(shè)計的引物對菌株LD 1.0008進行PCR擴增,發(fā)現(xiàn)其至少含有4 個植物乳桿菌素相關(guān)編碼基因,即plnD、plnO、plnV和plnW。
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