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高靈敏度磁熒光免疫層析試紙模式構(gòu)建及在嘔吐毒素檢測(cè)中的應(yīng)用
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 258 發(fā)表時(shí)間: 2022-10-24
作者: 孫亞寧,楊蘇珍,楊繼飛,胡驍飛,陳鑫鑫,張穎碩,鄧瑞廣,張改平
關(guān)鍵詞: 磁熒光納米顆粒;免疫學(xué)檢測(cè);嘔吐毒素;試紙
摘要:

構(gòu)建基于磁熒光納米材料的免疫層析試紙模式,彌補(bǔ)現(xiàn)在免疫層析技術(shù)的不足,為更靈敏的免疫學(xué)快速檢測(cè)提供技術(shù)支撐。以嘔吐毒素(deoxynivalenol,DON)為靶標(biāo),采用溶劑熱法制備羧基修飾的超順磁顆粒,碳二亞胺法將磁顆粒、綠色熒光蛋白及DON單克隆抗體進(jìn)行偶聯(lián),一步法制備磁熒光抗體探針,以DON人工抗原(DON-BSA)為檢測(cè)線建立磁熒光免疫層析試紙。同時(shí)用膠體金標(biāo)記DON單克隆抗體,以DON-BSA為檢測(cè)線建立膠體金免疫層析試紙;制備的磁熒光抗體探針具有很好的磁性、熒光特性及抗體反應(yīng)性,基于該探針成功制備了DON磁熒光免疫層析試紙,該試紙回歸方程為y=-0.562x+0.921,R2=0.990,IC50為5.611 ng/mL,檢出限為1.089 ng/mL;制備了DON膠體金免疫層析試紙,該試紙裸眼檢測(cè)靈敏度為500 ng/mL;定量檢測(cè)回歸方程為y=-0.543x+1.485,R2=0.991,IC50為65.16 ng/mL,檢出限為11.94 ng/mL。DON磁熒光免疫層析試紙的靈敏度是膠體金免疫層析試紙的10.96 倍。本實(shí)驗(yàn)建立的磁熒光免疫層析試紙模式可以同時(shí)實(shí)現(xiàn)樣品的富集及熒光信號(hào)檢測(cè),提高檢測(cè)靈敏度,并成功用于DON的檢測(cè),為磁熒光納米顆粒廣泛應(yīng)用于免疫層析領(lǐng)域提供參考。

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