本實(shí)驗(yàn)以紫萼玉簪(Hosta ventricosa)為原材料,采用響應(yīng)面法優(yōu)化其根系多糖(Hosta ventricosa root polysaccharide,HVRP)的提取工藝,探索HVRP對(duì)叔丁基過氧化氫(tert-butyl hydroperoxide,t-BHP)誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用機(jī)制。結(jié)果表明:在提取溫度84 ℃、提取時(shí)間3 h、料液比1∶31條件下,HVRP平均提取率達(dá)到23.9%;HVRP中還原性糖、蛋白質(zhì)、糖醛酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為11.17%、0.6%、12.31%,含有多糖類物質(zhì)的特征吸收峰,不存在三螺旋構(gòu)象。體外抗氧化和細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,HVRP具有較強(qiáng)的抗氧化活性,能顯著或極顯著降低t-BHP誘導(dǎo)氧化損傷HepG2細(xì)胞內(nèi)活性氧、丙二醛含量并提高過氧化氫酶、超氧化物歧化酶、還原型谷胱甘肽及谷胱甘肽過氧化物酶水平(P<0.05、P<0.01)。通過實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和蛋白質(zhì)免疫印跡分析發(fā)現(xiàn),HVRP可通過調(diào)控Kelch樣環(huán)氧氯丙烷相關(guān)蛋白1/核因子E2相關(guān)因子2/抗氧化反應(yīng)元件信號(hào)通路促進(jìn)抗氧化酶表達(dá),從而改善t-BHP誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞氧化損傷。本研究可為闡明HVRP抗氧化作用機(jī)制及其在功能性食品中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。
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