領(lǐng)學術(shù)科研之先，創(chuàng)食品科技之新
—— 中國食品雜志社
目的：成熟的鯽魚卵經(jīng)提取、分離純化得到唾液酸糖蛋白（sialyglycoproteins of Carassius auratus eggs，CA-SGP），分析其化學結(jié)構(gòu)，及對前成骨細胞MC3T3-E1增殖分化的影響。方法：采用水提法從成熟鯽魚卵中提取水溶性蛋白，經(jīng)陰離子交換色譜、凝膠過濾色譜分離純化鯽魚卵水溶性蛋白得到CA-SGP，測定其基本組成，采用高效凝膠液相色譜和聚丙烯酰胺凝膠電泳測定其分子質(zhì)量和純度，PMP柱前衍生高效液相色譜法測定其單糖組成；采用噻唑藍法測定MC3T3-E1細胞的增殖率，酶聯(lián)免疫法測定Ⅰ型膠原蛋白（collagen type Ⅰ，COLⅠ）和骨鈣素（osteocalcin，OCN）的分泌量及堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）的活性，茜素紅染色法測定礦化結(jié)節(jié)的數(shù)量。結(jié)果：得到單一的組分CA-SGP，在高效凝膠過濾色譜色譜圖上呈現(xiàn)單一的糖和蛋白的檢測重疊峰，在凝膠電泳圖上呈現(xiàn)單一彌散性條帶，其蛋白質(zhì)含量為14.33%，己糖含量為62.81%，N-乙酰神經(jīng)氨酸（N-acetylneurainic acid，Neu5Ac）含量為19.72%。單糖組成測定結(jié)果顯示：CA-SGP主要由甘露糖、葡萄糖胺、半乳糖胺組成，其物質(zhì)的量比為7.61∶6.70∶1.00；MC3T3-E1細胞與CA-SGP共同孵育后，其增殖率顯著增加，COLⅠ和OCN的分泌量分別增加了39.28%和83.06%，ALP活性提高了285.08%，礦化結(jié)節(jié)的數(shù)量增加了96.41%，說明CA-SGP顯著促進MC3T3-E1細胞增殖、分化和礦化。結(jié)論：CA-SGP為富含Neu5Ac的糖蛋白，具有顯著促進MC3T3-E1細胞增殖、分化和礦化的作用，對開發(fā)抗骨質(zhì)疏松功能性食品具有重要意義。
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