研究黑靈芝多糖(PSG-1)對結(jié)腸癌細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)信號途徑的影響。實(shí)驗(yàn)設(shè)5組:空白對照組,50、100、200μg/mL PSG-1組,5-氟尿嘧啶(5-Fu)陽性對照組。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞的凋亡,用IBL試劑盒檢測胞內(nèi)cAMP的濃度、PKA的活性,半定量RT-PCR法分析cAMP和PKA的mRNA表達(dá)變化。結(jié)果表明:PSG-1能誘導(dǎo)CT26細(xì)胞凋亡;PSG-1顯著提高細(xì)胞內(nèi)cAMP的濃度,3種質(zhì)量濃度PSG-1作用后cAMP濃度分別比空白對照組升高了20.18%、38.67%和56.25%(P<0.05);與空白對照組相比,PSG-1各組細(xì)胞的PKA活性分別上升了15.42%、18.76%和38.26%(P<0.05)。另外,PSG-1組胞內(nèi)的PKA和CREB mRNA的表達(dá)量比空白對照組也明顯增加。結(jié)果顯示,PSG-1能夠引起胞內(nèi)cAMP 濃度升高、PKA活性增強(qiáng),從而激活小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞內(nèi)cAMP/PKA信號途徑。
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