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鴨心蘋果酸脫氫酶的分離純化及酶學(xué)性質(zhì)
來源:食品科學(xué)網(wǎng) 閱讀量: 149 發(fā)表時(shí)間: 2017-06-07
作者: 孫 芳,胡瑞斌,任美鳳,唐云明
關(guān)鍵詞: 鴨心;蘋果酸脫氫酶;分離純化;性質(zhì)
摘要:

取新鮮鴨心,通過勻漿、硫酸銨沉淀、有機(jī)溶劑沉淀、DEAE-Sepharose層析以及Superdex-200層析等方法純化,獲得鴨心中所含的兩種電泳純的蘋果酸脫氫酶同工酶(c-MDH和m-MDH),并對粗酶液中含量較高的c-MDH進(jìn)行酶學(xué)性質(zhì)研究。結(jié)果表明:c-MDH和m-MDH純化倍數(shù)分別為69.07倍和130.40倍,酶活力回收率分別為25.54%和10.98%,亞基分子質(zhì)量分別為39.58ku和37.62ku。c-MDH酶學(xué)性質(zhì)研究表明:該酶最適反應(yīng)溫度為55℃,在30℃以下時(shí)比較穩(wěn)定;最適反應(yīng)pH為7.2,在pH6~9范圍內(nèi)穩(wěn)定性較好;其對草酰乙酸的Km值為140.93mmol/L;草酸、SDS、Cu2+、Ag+對該酶的抑制作用非常強(qiáng)烈,而Mg2+、K+、Ba2+對該酶表現(xiàn)出明顯的激活作用。

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