目的:半胱氨酸酶抑制劑(cC)L68Q突變后能夠以二聚體開始進(jìn)一步產(chǎn)生類淀粉樣聚集。研究姜黃素對基因重組突變cC的畢赤酵母Pichia pastoris X-33表達(dá)菌的生長和分泌的影響,以及抑制突變cC的類淀粉樣聚集的作用。方法:采用響應(yīng)面法優(yōu)化姜黃素的提取工藝,通過液體比濁法探究姜黃素對基因重組菌株生長抑制的作用,通過SDS-PAGE研究不同濃度的姜黃素對cC的分泌的作用,通過剛果紅染色法研究姜黃素對cC蛋白聚集的抑制作用。結(jié)果:由Design-Expert響應(yīng)面分析軟件得到姜黃素最佳提取條件為:液固比30:1(mL/g)、超聲功率300W、提取時間15min,此條件下提取率達(dá)3.97mg/g。姜黃素對重組菌體生長的抑制作用的相對穩(wěn)定,但隨著姜黃素添加量的增加,其對蛋白分泌量和聚集沉淀量均抑制明顯。結(jié)論:姜黃素對基因重組cC的生長、分泌和聚集有抑制作用。
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